养血解毒方对银屑病角质形成细胞紧密连接的调节作用

目的:观察银屑病样小鼠皮损紧密连接蛋白中水闸蛋白(claduin-1,claudin-7),闭锁蛋白(occludin)的表达,明确养血解毒方对银屑病表皮通透屏障的修复作用,为养血解毒方治疗银屑病提供科学依据。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、甲氨喋呤组、养血解毒方组,制备甲氨喋呤溶液、养血解毒方水煎剂对应灌胃干预,同时小鼠背部剃毛后给予咪喹莫特涂抹诱导银屑病样皮损模型。每日拍照记录皮损形态并对严重程度指数(PASI)评分;水油测试笔检测皮损表皮含水量;苏木素-伊红(HE)染色观察其病理改变、测量表皮厚度;免疫荧光法检测增殖相关的核抗原(Ki67);免疫组化法检测表皮兜甲蛋白(loricrin),真皮中CD3^+T淋巴细胞浸润和紧密连接蛋白claduin-1,claudin-7,occludin的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测皮损中claudin-7,occludin的表达。模拟银屑病皮损微环境,建立白细胞介素-17(IL-17,1 mg·L^-1)刺激的角质形成细胞(Hacat)模型,制作养血组分、解毒组分、养血解毒方喷干粉进行干预。采用细胞增殖毒性检测试剂盒-8(CCK-8)法检测药物对Hacat细胞的毒性;细胞免疫荧光法检测药物对角质形成细胞claudin-1,claudin-7,occludin表达的干预作用。结果:与模型组比较,养血解毒方可显著减轻小鼠银屑病样皮损表现,降低PASI评分及皮损表皮厚度(P<0.01),增加皮损区表皮水分含量(P<0.01),减少表皮ki67,loricrin的异常表达和真皮CD3+T细胞浸润(P<0.01),并增加紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05),增加紧密连接结构的完整性;体外研究发现,与模型组比较,养血解毒方组和养血组分组明显升高紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05);与模型组比较,解毒组分组蛋白表达水平无统计学差异。结论:养血解毒方通过调节角质形成细胞间紧密连接的表达抑制其异常的增殖分化过程,进一步恢复破坏的表皮通透屏障,可能是其治疗银屑病的作用机制之一。其中养血解毒方的养血组分对调节紧密连接的修复起主要作用。     

“治未病”思想在老年高血压病防治中的应用探讨

老年高血压病以肾气亏虚为主要病机,具有特殊的发病基础、临床症状、传变规律和预后。以"治未病"思想为指导,在老年高血压病发生、发展、预后的各个阶段进行提前干预,有利于扶助正气,增强抗病能力,延缓病情进展。具体而言,未病之时,应通过调整生活方式、服用中药保养和培补肾气,做到未病先防。已病之时,既病防变,阴阳俱虚者,治以补益肾气,方选肾气丸加减;肾阴虚者,治以滋阴补肾,方选左归丸合天麻钩藤饮加减;肾阳虚者,治以温补肾阳,方选右归丸加减。疾病初愈之时,继续以中药补肾虚、调气血,同时避免六淫邪气与情志内伤对机体的损害,以防疾病复发。     

慢性肾脏病患者血压形态特点及临床疗效分析

目的 研究慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）患者血压形态特点，以及睡前服用降压药对患者临床疗效影响。方法 2018年1月至2019年9月住院的182例CKD合并高血压患者的动态血压数据和临床指标，描述患者的血压昼夜节律特点和特殊血压类型分布。分析睡前服用降压药对患者临床疗效影响。结果 不同CKD分期患者的年龄、24 h收缩压、白天收缩压、夜间收缩压差异有统计学意义。CKD合并高血压患者血压形态以非杓型为主。与杓型血压组患者比较，非杓型或反杓型患者的年龄、超敏C反应蛋白（hypersensitive C reactiveprotein，hs CRP）偏高，血红蛋白偏低（P＜0.05）；多因素回归分析显示年龄、hs CRP是发生异常血压节律的独立危险因素。患者的诊室血压控制率25.3%，动态血压控制率14.3%，均控制率5.5%，夜间血压未控制率83.5%。19.8%的患者有隐匿性高血压，8.8%的患者有白大衣性高血压。将降压药改为睡前服用的患者3个月后的24 h尿蛋白和血尿酸显著改善（P＜0.05）。结论 CKD合并高血压患者的血压形态以非杓型为主。年龄、hs CRP是发生血压节律异常的独立危险因素，血红蛋白越低的患者更容易发生非杓型血压。睡前服用降压药可能通过恢复血压昼夜节律来减少尿蛋白及降低血尿酸。     

三位一体无缝隙护理在妊娠期高血压中的应用

目的对三位一体无缝隙护理在妊娠期高血压中的应用进行观察和分析。方法选择了2018年6月—2018年12月在本院进行了妊娠期高血压护理的60例患者进行研究,对所有患者均采取了三位一体无缝隙护理,对所有患者干预前后血压控制情况、生命质量评分以及心理健康评分进行对比。结果在进行干预之后,患者的血压控制情况、生命质量以及心理健康情况均显著优于干预之前,P<0.05差异有统计学意义。结论在对妊娠期高血压患者护理时,采取三位一体无缝隙护理措施可以对患者血压情况进行控制,缓解患者负面情绪,能够给予患者以及胎儿一定的保障。     

MKS1 基因变异所致Joubert 综合征1 例临床及基因分析

目的对Joubert 综合征进行临床特点和遗传学分析。方法回顾分析1例确诊的Joubert 综合征患儿的临床资料。结果患儿男性,3个月,双眼不追视、发育落后,四肢肌张力偏低。头颅磁共振示"磨牙征"。全外显子测序显示患儿MKS1基因c.1411_c.1412insG及c.44AG复合杂合突变。Sanger测序验证c.1411_c.1412insG移码突变来自于父亲,已有报道;c.44AG错义突变来自于母亲,未见报道,根据ACMG指南为可能致病变异。患儿确诊为Joubert综合征。结论确诊患儿为Joubert综合征,新发现c.44AG错义突变。     

基于数据挖掘的黄有荣教授治疗腰椎间盘突出症用药规律分析

目的应用数据挖掘的方法总结和分析黄有荣教授治疗腰椎间盘突出症的用药规律,为临床中医药治疗腰椎间盘突出症提供参考。方法收集、整理黄有荣教授首诊治疗腰椎间盘突出症的病例,对符合纳入标准的病例中使用的中药进行统计分析,运用SPSS20.0 for Windows统计软件对中药的频数、聚类规则进行分析,运用SPSS Modeler 14.1统计软件对药物用药规律进行数据挖掘。结果共有263份病例符合纳入标准,共使用中药210味,总计出现频次3582次,分析得出使用高频次药物有当归、牛膝、甘草、杜仲等33味中药;高频次药物组合主要包含当归与赤芍、当归与桃仁、牛膝与党参、当归与川芎等;治疗腰椎间盘突出症用药以补虚药、活血化瘀药、祛风湿药类药物为主,药物归经主要归肝、肾、脾经。结论黄有荣教授治疗腰椎间盘突出症以补益肝肾、活血化瘀为主,辅以祛风湿,通络止痛为治疗原则,独活寄生汤是其治疗的基础方剂,数据挖掘客观反映了黄有荣教授临床用药规律。     

TLR4基因结构和功能的生物信息学分析

目的运用生物信息学的各种方法,对TLR4基因的结构和功能进行深入分析。方法依托生物信息学的各种软件,对TLR4基因启动子及其所编码的氨基酸理化性质、信号肽、跨膜结构、蛋白质的二级结构、蛋白质三级结构、蛋白质翻译后修饰、蛋白质相互作用进行生物信息学分析。结果 TLR4基因只有一个启动子;TLR4蛋白属于亲水的不稳定蛋白,等电点为5.88;TLR4蛋白大多数位于膜外的分泌蛋白并且有信号肽;二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主;三级结构稳定可靠;N-糖基化位点和O-糖基化位点各有10和4位;磷酸化的位点有Ser:21,Thr:6,Tyr:7;TLR4蛋白可以与10个蛋白发生作用。结论深入分析TLR4基因的结构和功能,研究其与肝脏疾病之间的关系有很大的意义。     

儿童朗格罕细胞组织细胞增生症BRAFV600E突变对预后的影响

目的 探讨BRAFV600E突变在儿童朗格罕细胞组织细胞增生症（LCH）中的预后意义以及影响儿童LCH的预后因素。方法 回顾性纳入首都医科大学附属北京儿童医院2016年1月1日至2017年12月31日收治的初治LCH患儿，采用数字PCR方法检测患儿病灶组织中的BRAFV600E突变，分析突变与临床特征和预后的相关性，影响预后的因素。结果 140例LCH患儿纳入研究，诊断时中位年龄为2.2（0.1~15.7）岁，男89例（63.6%），女51例。临床分型为单系统（SS）60例（42.9%），多系统无危险器官受累（MS RO－）47例（33.6%），多系统有危险器官受累（MS RO+）33例（23.6%）。中位随访时间34.1（0.9~50.7）月，随访期内70例（50.0%）出现进展或复发，12例（9.6%）出现持续性后遗症，死亡3例（2.1%）。总体3年无进展生存率（PFS）、无事件生存率（EFS）和总生存率（OS）分别为（48.9±4.5）%、（46.6±4.4）%和（97.8±1.2）%。①儿童LCH中BRAFV600E突变阳性率67.1%（94/140）。②BRAFV600E突变与患儿临床分型明显相关，突变阳性率MS RO+患儿（90.9%）高于MS RO－患儿（53.2%）或SS患儿（65.0%）（P=0.001）；皮肤受累患儿中突变阳性率（77.8%）高于非皮肤受累的患儿（P=0.042）；③BRAFV600E突变阳性患儿进展/复发率（57.4%）高于突变阴性患儿（34.8%），P=0.019。3种临床分型中突变阳性和阴性患儿的预后差异均无统计学意义。④多因素分析结果表明，危险器官受累是影响LCH患儿PFS的独立预后因素（HR=2.702，P=0.003），垂体受累（HR=3.582，P<0.001）、危险器官（HR=2.321，P=0.008）和耳部受累（HR=2.093，P=0.013）是EFS的独立预后因素。结论 LCH患儿BRAFV600E突变与危险器官受累密切相关，突变阳性患儿的进展/复发率高于突变阴性患儿，BRAFV600E不是儿童LCH的独立预后因素。     

补骨脂素抗增生性瘢痕作用机制研究

目的探讨补骨脂素抗增生性瘢痕的作用机制。方法体外培养成纤维细胞,按随机数字表法分为正常组(培养正常成纤维细胞)、瘢痕组(培养增生性瘢痕成纤维细胞)、TGF-β1组(10 ng/ml TGF-β1处理增生性瘢痕成纤维细胞5 min^12 h)、Smurf2 RNA干扰组[Smad泛素化调节因子2(Smad ubiquitin regulatory factor2,Smurf2)siRNA转染增生性瘢痕成纤维细胞72 h]、补骨脂素组(10μmol/L补骨脂素处理增生性瘢痕成纤维细胞继续培养72 h)、补骨脂素+TGF-β1组(增生性瘢痕成纤维细胞加入补骨脂素培养72 h后加入TGF-β1培养6 h)。采用Western blot法检测Smurf2、α-平滑肌肌动蛋白(α-actin SMA,α-SMA)蛋白表达;RT-PCR法检测Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达;ELISA法检测TGF-β1蛋白分泌。结果与正常组比较,瘢痕组Smurf2蛋白[(0.83±0.08)比(0.38±0.07)]表达增加(P<0.05);与瘢痕组比较,Smurf2 RNA干扰组TGF-β1[(2.2±0.18)比(4.2±0.47)]表达降低(P<0.05);TGF-β1组Smurf2[(0.71±0.06)比(0.42±0.04)]、α-SMA[(1.42±0.12)比(0.91±0.09)]蛋白表达增加(P<0.05),Ⅰ型胶原蛋白mRNA[(0.72±0.09)比(0.41±0.07)]表达增加(P<0.05);补骨脂素组Smurf2[(0.05±0.01)比(0.42±0.04)]、α-SMA[(0.71±0.07)比(0.91±0.09)]蛋白表达降低(P<0.05),Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达[(0.12±0.04)比(0.41±0.07)]降低(P<0.05)。结论补骨脂素可能通过TGF-β1/Smurf2信号通路抑制α-SMA蛋白表达,从而降低Ⅰ型胶原蛋白表达,起到抑制瘢痕形成的作用。